用血清超速离心法提取外泌体,能提取到多少
细胞培养上清:建议单次提取的样品量不低于 20mL。若采用超速离心法,第一次摸索条件时,起始培液量最好 50mL 以上。如果是一些外泌体释放量低的细胞系,可能需要上百毫升。血清或血浆:单次提取量建议不低于 200μL。如果是进行超速离心,一般每 5mL 算作 1 个样本。
收集上清液,转移至超速离心管中,以 100000g 或更高转速离心 70 分钟左右,使外泌体沉淀在离心管底部。小心弃去上清液,用适量的 PBS 重悬外泌体沉淀,即可获得外泌体样本。试剂盒法 选择市面上成熟的外泌体提取试剂盒,按照说明书准备试剂和样本。
最后将上清液转移至超速离心管中,以 100000g 或更高的转速超速离心 70-90 分钟,使外泌体沉淀在离心管底部。蛋白质提取:弃去上清液,用适量的 PBS 缓冲液重悬外泌体沉淀。加入含有蛋白酶抑制剂的细胞裂解液,如 RIPA 裂解液,在冰上孵育 30 分钟,期间可轻轻振荡或颠倒离心管,使外泌体充分裂解。
进行超速离心,一般离心速度为 100000 - 150000g,离心时间 1 - 3 小时。离心后,外泌体将分布在特定密度层,可以收集该层液体获得外泌体。优点:可以有效分离与外泌体密度不同的杂质,能够进一步提高外泌体的纯度。
以下是一些可以相对快速地从尿液中提取高纯度外泌体的方法及要点:超速离心法 样本收集与预处理:收集新鲜尿液,一般建议收集晨尿,因为其成分相对稳定。将尿液在 4℃下以 3000g 离心 15 分钟,去除细胞和细胞碎片等大颗粒杂质,取上清液。
超速离心法(差速离心)是最常用的外泌体提取方法之一,通过低速和高速离心的交替使用,可以分离出大小相近的囊泡颗粒。这种方法操作简单,获得的囊泡数量较多,也是崔老师近期研究中采用的方法。
正常人的基础代谢率是多少
正常人基础代谢值是-10%至+15%,基础代谢率对甲状腺及垂体疾病的诊断,具有重要的意义。基础代谢率(BMR)是指人体在清醒而又极端安静的状态下,不受肌肉活动、环境温度、食物及精神紧张等影响时的能量代谢率。
基础新陈代谢率是一个人每天身体基本所需要的热量,它是维持生命活动的最低热量需求。
正常人基础代谢值为-10%~+15%。如果超出这个比值范围的话,说明身体的内分泌失调需要进行调理。基础代谢(basalmetabolism,BM)是指人体维持生命的所有器官所需要的最低能量需要。测定方法是在人体在清醒而又极端安静的状态下,不受肌肉活动、环境温度、食物及精神紧张等影响时的能量代谢率。
女生基础代谢多少正常
一般正常女性的基础代谢率大约为1200卡路里左右。 基础代谢率的测量需要在清晨、空腹、静卧状态下进行,以确保准确性。 基础代谢率的单位是KJ/m2/h(千焦/平方米/小时),用于表示每小时每平方米体表散发的热量。
女生基础代谢率的正常范围是1000-1200卡路里,这代表在静态状态下,维持器官、组织、细胞等基本生命活动所需的最低能量消耗。基础代谢率涉及一系列生理过程,如化学合成、肾脏过滤、腺体分泌以及物质运输等。若女性的基础代谢率过低,可能会引发肥胖、精神状态不佳、食欲不振等问题。
女孩基础代谢的一切正常范畴值是1000-1200热量中间。女孩基础代谢过低,非常容易造成 身体出现肥胖症、精神不振、胃口降低等欠佳病症。女孩基础代谢过高,非常容易造成 身体发热量耗费过大,造成身体出现削瘦、中枢神经激动、肌肉无力、新陈代谢充沛等病症。
女生基础代谢率的正常范围值是1000-1200卡路里之间,基础代谢率是指人体在静态时,维持人体各器官、各组织、各细胞的消耗最低卡路里,也就是其消耗的最低能量。基础代谢率主要用于人体内的化合作用、肾脏过滤、腺体分泌,以及物质运输等过程中。
男性的基础代谢率正常值大约在850-1150卡路里之间。 女性的基础代谢率正常值大约在680-920卡路里之间。嘿,小伙伴!说到基础代谢率,这可是咱们身体的小秘密哦。男生的话,差不多在1000卡路里左右晃悠就算是正常值啦,当然啦,上下浮动个15%也是没关系的。