环状RNA成环验证实验哪里能做？
通过circRNA的ID（如hsa_circ_0006156）在circBase（circbase.org）上搜索，找到相关界面。选择fasta格式，设置为spliced模式，点击搜索，下载全长序列。使用记事本打开下载的fasta文件，获取所需序列。实验工具与解决方案 在实际研究中，克隆的circRNA序列可能无法自然形成环状，影响功能研究。
点击position genome browser link，用户可以查看详细序列信息，如DNA正负链、剪切长度等，并能下载序列。对于多个circRNA的研究，list search功能允许用户一次性输入多个RNA，选择合适的长度和样品支持，便于后续实验验证。
通过检测backsplicing junction site，即环状RNA特有的反向剪接位点，可以准确判断CircRNA的存在及其序列。 研究方法： qPCR检测：在初步鉴定出CircRNA后，可以通过定量PCR进一步验证其表达水平。
在RNA pulldown实验中常见的坑及注意事项主要包括以下几点：探针设计不当：错误使用circRNA接头互补探针：在circRNA pulldown实验中，不能简单地使用circRNA接头互补探针，因为这不符合RNA pulldown的基本原理。正确做法应该是标记circRNA的全长序列并加上接头，以模拟环状RNA的结构。
取环全过程是怎样的
女性的取环手术是一种宫腔内的无菌操作。在进行取环手术时，患者首先被安排躺在检查床上，采取膀胱截石位。接着，医生会进行无菌消毒并铺设无菌巾，以防止外部细菌侵入并引发感染。然后，医生会使用窥器并用碘伏对阴道和宫颈进行消毒。
取环是在月经干净后3-7天内进行，若是女性过度紧张或存在环嵌顿，也需要采用无痛麻醉下取出。
如果是放置的带尾丝的节育环，取环的过程是非常快，1-2分钟就可以将它取出来，因为有尾丝的环，取的时候不要进宫腔，只要在阴道里面将尾丝钳夹住取出就行。如果不是带尾丝的环，就要进宫腔，这个时候就要看患者的年龄，如果是年轻女性，取环手术比较短2-3分钟就可以。
取环过程相对简便，主要通过医生使用取环钩钩住节育环后轻轻拉出，带尾丝的环可轻易取出，患者通常感觉不明显；无尾丝的环则需工具辅助。取环后，阴道流血量一般不多，持续时间约为一周，如有增多需及时就医。取环的适宜时机包括计划怀孕、无避孕需求、带环后出血异常等。
取节育环的全过程与上节育环恰好反过来，用取节育环钩将环取下来就可以。一般来说，手术时间很短。但也是有某些特殊情况，手术治疗可能很艰难乃至取节育环不成功(如绝经时间较长、环嵌顿或破裂等)。
吉妮环取环过程
吉妮环取环前需要去医院进行检查，比如白带常规检查、B超检查。如果宫颈口比较紧还需要在医生指导下合理使用软化宫颈口的药物，术前需要禁食禁水，可以用取环钩把环勾出来，先用碘伏擦外阴消毒，再用扩阴器扩开阴道。
吉妮环的取环过程主要包括以下步骤：术前准备：检查：取环前需要去医院进行白带常规检查、B超检查等，以确认环的位置和身体状况是否适合取环。软化宫颈口：如果宫颈口比较紧，需要在医生指导下合理使用软化宫颈口的药物。禁食禁水：术前需要禁食禁水，以确保手术过程中的安全。
说说我所经历的两个具体取环过程：第一个可以在宫颈口看到尾丝，但牵拉时断裂。另一个医生上来，探查宫腔后使用刮匙将环完整刮出。后来请教，说是利用刮匙头部齿，找到顶端铜套与宫底固定处间隙，稍微转变方向，紧贴宫壁以防滑脱，再向下缓慢、均匀用力取出。适用于尾丝虽断，但连接各个铜套的线完整。
在没有嵌顿的情况下，吉妮环相对比较好取。取环时，医生会将取环器放入宫颈外口内侧，然后轻轻牵拉吉妮环的尾部，即可将其取出。最难取节育环的判断：最难取的节育环并不一定是某种特定类型的环，而是取决于节育环是否出现崁顿等异常情况。一旦出现崁顿，就需要在宫腔镜下才能将节育环取出。
吉妮环在取环的时候应充分消毒，用止血钳进入宫颈内口钳住尾丝，将环轻轻拽出，不可生拉硬拽，吉妮环是由比利时妇科专家Dr.Wildemeersch发明的。
取吉妮环时感觉特别疼，主要有以下原因： 植入方式特殊： 吉妮环的顶部有一个线头，该线头被植入到子宫肌层中，以确保环不会脱落。 取环过程涉及肌层： 在取吉妮环时，需要将植入肌层的环顶部拽出。这个过程可能会刺激子宫肌层，导致疼痛。
取环手术全过程
1、术前准备就绪后阴道窥器暴露宫颈，碘伏消毒宫颈，按照宫体的位置用探针探测宫腔的深度和节育环的位置，将取环钩进入宫腔内钩住节育环取出。
2、取环手术全过程如下：术前准备：时间安排：取环手术最好在月经干净后的35天进行。消毒处理：医生使用窥器扩开阴道，暴露出子宫颈，并用5%碘酒和新洁尔进行消毒。手术操作：钳夹宫颈：医生使用宫颈钳钳夹宫颈的前唇和后唇，以保持手术视野清晰。
3、如果是放置的带尾丝的节育环，取环的过程是非常快，1-2分钟就可以将它取出来，因为有尾丝的环，取的时候不要进宫腔，只要在阴道里面将尾丝钳夹住取出就行。如果不是带尾丝的环，就要进宫腔，这个时候就要看患者的年龄，如果是年轻女性，取环手术比较短2-3分钟就可以。
4、手术过程：进行取环手术时，医生先探明确定节育环的位置。把取环器送入子宫腔，用取环钩沿子宫后壁缓缓前进，接触到金属物时，稍抬起钩柄，再稍稍前进，然后放下钩柄，缓缓向后退出，多能将环钩住拉出。
5、取环手术的全过程时间因多种因素而异，具体如下：带尾丝的节育环：取环过程非常快，通常只需12分钟。因为有尾丝的环在取时不需要进入宫腔，只需在阴道里面钳夹住尾丝取出即可。非带尾丝的节育环：取环手术相对较短，一般需要23分钟。因为年轻女性的宫颈和宫腔条件相对较好，手术操作相对容易。
取环手术全过程多久
对于不带尾丝的避孕环，取环过程需要进入宫腔。年轻女性取环手术时间较短，大约2到3分钟。 绝经后的女性由于子宫颈可能出现萎缩，取环手术时间相对较长，且避孕环放置时间越长，手术时间也可能越长。
取环手术的全过程时间因多种因素而异，具体如下：带尾丝的节育环：取环过程非常快，通常只需12分钟。因为有尾丝的环在取时不需要进入宫腔，只需在阴道里面钳夹住尾丝取出即可。非带尾丝的节育环：取环手术相对较短，一般需要23分钟。因为年轻女性的宫颈和宫腔条件相对较好，手术操作相对容易。
一般而言，无痛取环的整个手术过程大约需要十几分钟。首先，医生会进行静脉注射麻醉药，这个过程大约持续五分钟。待麻醉生效后，医生将扩张宫颈，随后将节育环取出。整个过程相对快速。然而，如果女性因宫颈狭窄等个体差异，取环的时间可能会稍长。尽管无痛取环的过程较为迅速，但术后注意事项同样重要。
